日本老年老熟无码,久久国产精品波多野结衣av,欧美艳星nikki激情办公室,永久免费无码网站在线观看

您好!歡迎訪問和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司網(wǎng)站!
咨詢熱線

18616108315

當(dāng)前位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 鬼筆環(huán)肽染色原理(Alexa Fluor 488 標(biāo)記鬼筆環(huán)肽使用方法)

鬼筆環(huán)肽染色原理(Alexa Fluor 488 標(biāo)記鬼筆環(huán)肽使用方法)

更新時間:2024-10-15      點擊次數(shù):510

鬼筆環(huán)肽是一種雙環(huán)七肽毒素,它能選擇性的與動植物體內(nèi)的纖維狀的肌動蛋白 (F-actin) 結(jié)合,這種特殊的選擇性使之成為研究細胞內(nèi)肌動蛋白微絲 (F-actin) 的有力工具。在光學(xué)顯微鏡下, 熒光標(biāo)記過的鬼筆環(huán)肽 (phalloidin-dye conjugate) 可以清晰地顯示出細胞內(nèi)微絲的形態(tài)和分布,廣泛被應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)的研究當(dāng)中。

/ueditor/image/20241015/1728962033657394/AC18L032-Alexa Fluor 488 標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(綠色).jpg

鬼筆環(huán)肽染色原理

熒光標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽在納克水平就可與F-actin選擇性的結(jié)合并且易溶于水,為檢測組織切片,培養(yǎng)細胞和無細胞體系中的actin的定位和定量提供了非常方便的標(biāo)記方法。通過其熒光特性,在特定波長光的激發(fā)下發(fā)出熒光,使得細胞內(nèi)肌動蛋白絲的結(jié)構(gòu)和分布清晰可見。
鬼筆環(huán)肽使用方法

以Alexa Fluor 488 標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(綠色)為例

第1:準(zhǔn)備1× Alexa Fluor 488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽工作液吸取1 μL 1000×Alexa Fluor 488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽存儲液到1 mL 含有1% BSA的PBS緩沖液中即可得到1×工作液。

第2:細胞染色步驟

(1) 細胞培養(yǎng)過夜或更長,使其密度達到50~60% 匯合度。

(2) 吸掉培養(yǎng)液,37℃ 預(yù)熱的1×PBS(pH 7.4)清洗細胞2次。

(3) 使用含有3-4% 甲醛的PBS溶液進行細胞固定,室溫固定10~30 min。

(4) 室溫條件下,用PBS清洗固定好的細胞2~3次,每次10 min。

(5) (可選):室溫條件下,用溶于PBS的0.1% Triton X-100溶液透化處理3~5 min,從而增加其通透性。

(6) 室溫條件下,用PBS清洗細胞2~3次,每次10 min。

(7) 每孔加入 Alexa Fluor 488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽工作液100 μL /孔(96孔板),室溫避光染色20~90 min,夏季時間相對短些。

(8) 用PBS清洗細胞3次,每次5 min,去除掉多余的Alexa Fluor 488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽。

(9) (可選):加入足量的即用型DAPI溶液對細胞核進行復(fù)染,如:100 μL /孔(96孔板),室溫3~5 min。用PBS清洗細胞2次,每次5 min。

(10)  于熒光顯微鏡或者共聚焦顯微鏡下進行熒光觀察,選擇Alexa FluorTM 488激發(fā)/發(fā)射濾片和/或DAPI激發(fā)/發(fā)射濾片(Ex/Em=364/454nm)。
鬼筆環(huán)肽注意事項

? 儲存條件:鬼筆環(huán)肽及其熒光標(biāo)記衍生物應(yīng)儲存在-20℃以下,保持干燥并避光。

? 細胞處理:在進行鬼筆環(huán)肽染色前,細胞應(yīng)經(jīng)過適當(dāng)?shù)墓潭ê蜐B透處理,以確保染色效果。

? 熒光顯微鏡設(shè)置:根據(jù)所使用的熒光標(biāo)記鬼筆環(huán)肽的激發(fā)和發(fā)射波長,調(diào)整熒光顯微鏡的設(shè)置以獲得最佳的觀察效果。

? 不同的細胞染色情況不同,相應(yīng)Alexa Fluor鬼筆環(huán)肽使用量也需根據(jù)不同情況而定。

? 毒性較大,需帶上手套操作

? 避免固定劑中含有甲醇成分,因為甲醇在固定過程中可能破壞肌動蛋白。

488綠色鬼筆環(huán)肽產(chǎn)品推薦

[品牌]  和元李記

[產(chǎn)品]  488 標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(綠色)

[貨號]  AC18L032

[規(guī)格]   300T


微信咨詢
地址:上海市浦東新區(qū)紫萍路908弄 傳真:021-50724961
©2025 和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司 版權(quán)所有 All Rights Reserved.  備案號:滬ICP備2023007219號-1
国产精品毛片va一区二区三区 | 国产免费AV片无码永久免费| 午夜福利麻豆国产精品| 国产精品人人做人人爽人人添| 精品一品国产午夜福利视频| 亚洲AV无码国产精品色午夜软件| 精品久久久久久无码中文野结衣| 久久久久亚洲精品无码网址 | 免费国产黄网站在线观看视频| 国产亚洲精品美女久久久久久 | 一二三四日本中文在线| 久久夜色精品国产亚洲AV动态图| 亚洲一久久久久久久久| 少妇spa按摩按出水了| 中文亚洲AV片在线观看无码| 太深太粗太爽太猛了视频免费观看| 亚洲av无码专区在线播放中文| 少妇人妻偷人精品无码av| 啊灬啊灬啊灬快灬深视频无遮掩| 国产精品人人做人人爽人人添| 亚洲综合一区二区三区无码| 精品久久久久中文字幕一区| 97碰碰碰免费公开在线视频| 亚洲国产欧美国产第一区| 无敌神马在线观看免费完整一| 国产激情一区二区三区app| 中文无码人妻在线一区不卡| 精品国产一区二区三区av 性色| 日本特黄特色大片免费视频| 亚洲人成色7777在线观看| 成人做爰a片免费看网站| 暴力调教一区二区三区| 亚洲成色在线综合网站| 久久久av精品波多野结衣| 日本亚洲洲精品码无无专区| 精品少妇人妻AV免费久久久 | AV无码专区亚洲AVL在线观看| 免费无码又爽又刺激a片涩涩软件| 欧美十大艳星| 男女边吃奶边做边爱视频| 亂倫近親相姦中文字幕|