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當(dāng)前位置:首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > 細(xì)胞生物學(xué) > 細(xì)胞轉(zhuǎn)染 > AC04L091細(xì)胞轉(zhuǎn)染步驟

細(xì)胞轉(zhuǎn)染步驟

簡(jiǎn)要描述:細(xì)胞轉(zhuǎn)染步驟,EZ Trans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑經(jīng)過李記生物的優(yōu)化處理,具有轉(zhuǎn)染效率高,細(xì)胞毒性低,操作簡(jiǎn)單,重復(fù)性好,適用范圍廣等特點(diǎn)。

  • 產(chǎn)品型號(hào):AC04L091
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2024-08-07
  • 訪  問  量:1788

詳細(xì)介紹

品牌其他品牌貨號(hào)AC04L091
供貨周期現(xiàn)貨應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè),綜合

 

EZ Trans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑EZ 慢病毒系列/細(xì)胞轉(zhuǎn)染步驟

轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)品描述

EZ Trans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑作為新一代的轉(zhuǎn)染試劑,其轉(zhuǎn)染原理是帶正電的陽(yáng)離子聚合物與核酸帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物后與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用,并通過胞吞作用進(jìn)入細(xì)胞。

產(chǎn)品經(jīng)過李記生物的優(yōu)化處理,具有轉(zhuǎn)染效率高,細(xì)胞毒性低,操作簡(jiǎn)單,重復(fù)性好,適用范圍廣等特點(diǎn)。

以下為高效轉(zhuǎn)染試劑說明書,其他產(chǎn)品詳情請(qǐng)問銷售人員。

細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑與慢病毒訂購(gòu)信息

產(chǎn)品名稱

貨號(hào)

規(guī)格

價(jià)格

EZ Trans Plus細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑(Ⅱ)

AC04L011

1 mL

690

EZ Trans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑(高效)

AC04L091

1 mL

300

EZ Trans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑(高效)

AC04L092

50 mL

3200

EZ Trans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑(低毒

AC04L098

1 mL

300

EZ Trans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑(低毒

AC04L099

50 mL

3200

EZ 慢病毒感染增強(qiáng)劑

AC04L432

50 mL

1800

EZ 慢病毒感染增強(qiáng)劑

AC04L433

100 mL

3200

EZ慢病毒濃縮液

AC04L441

50 mL

780

EZ慢病毒濃縮液

AC04L442

100 mL

1280

EZ慢病毒載體凍存保護(hù)液

AC04L452

50 mL

780

EZ慢病毒載體凍存保護(hù)液

AC04L453

100 mL

1280

轉(zhuǎn)染試劑運(yùn)輸與保存

藍(lán)冰運(yùn)輸。4℃保存,有效期12個(gè)月。】:不可冷凍!

高效轉(zhuǎn)染試劑使用方法(以 24 孔板為例,其他培養(yǎng)皿中轉(zhuǎn)染請(qǐng)參考表1)

1. 接種細(xì)胞

對(duì)于貼壁細(xì)胞,轉(zhuǎn)染前18-24 h進(jìn)行鋪板(不含抗生素),使其在轉(zhuǎn)染時(shí)的密度大約在80%左右。對(duì)于懸浮細(xì)胞,轉(zhuǎn)染當(dāng)天,配制EZ Trans-DNA復(fù)合物之前進(jìn)行鋪板,每500 µL生長(zhǎng)培養(yǎng)基中加入4~8×105cells。  

【注】:培養(yǎng)液中的血清不影響轉(zhuǎn)染效率。轉(zhuǎn)染試劑使用量受細(xì)胞類型及其他實(shí)驗(yàn)條件影響,建議初次使用時(shí)設(shè)置梯度進(jìn)行優(yōu)化最佳使用量。

2. 準(zhǔn)備EZ Trans-DNA復(fù)合物

1對(duì)于每孔細(xì)胞,將1 μg質(zhì)粒DNA稀釋到40 μL無(wú)血清的高糖DMEM培養(yǎng)基(或者OPTI-MEM Ⅰ 培養(yǎng)基),混勻。

2對(duì)于每孔細(xì)胞,將3 μL EZ Trans轉(zhuǎn)染試劑稀釋到40 μL無(wú)血清的高糖DMEM培養(yǎng)基(或者OPTI-MEM Ⅰ 培養(yǎng)基),輕輕混勻。

【注】:無(wú)血清的高糖DMEM培養(yǎng)基是稀釋液,不能使用含血清的培養(yǎng)基進(jìn)行DNA和EZ Trans轉(zhuǎn)染試劑的稀釋因?yàn)?/span>EZ Trans-DNA轉(zhuǎn)染復(fù)合物的形成過程不能含有血清。

3將稀釋好的EZ Trans轉(zhuǎn)染試劑盡快全部加入到已稀釋好的質(zhì)粒DNA中,輕輕混勻。

【注】:此混合的順序不能反向進(jìn)行。

4室溫放置10-15 min,以形成EZ Trans-DNA復(fù)合物。

3. 轉(zhuǎn)染細(xì)胞

1將上述80 μL EZ Trans-DNA轉(zhuǎn)染復(fù)合物均勻滴入到含細(xì)胞的培養(yǎng)皿中。輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)皿或輕微振蕩,讓EZ Trans-DNA復(fù)合物分散均勻。

237℃,5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)6-18 h,去除含EZ Trans-DNA復(fù)合物的培養(yǎng)液,更換新的培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)至對(duì)轉(zhuǎn)入基因表達(dá)分析。

【注】:篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株,轉(zhuǎn)染細(xì)胞24 h后,將細(xì)胞傳代至新鮮的生長(zhǎng)培養(yǎng)基中(將細(xì)胞稀釋10倍以上),在37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中孵育24 h,加入篩選培養(yǎng)基。在有轉(zhuǎn)染抗性基因相匹配的藥物篩選條件下,約 1~2周可篩選到耐藥性克隆,在這期間需經(jīng)常更換含篩選藥物的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。

注意事項(xiàng)

  1. 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

公司簡(jiǎn)介

  上海李記生物科技有限公司是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售為一體的高科技生物技術(shù)企業(yè),產(chǎn)品涵蓋細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、動(dòng)物學(xué)等,我們的產(chǎn)品都基于設(shè)計(jì),在保證品質(zhì)的前提下,具有易用、經(jīng)濟(jì)、高效的特點(diǎn)。
  我們立志做百年企業(yè),我們?cè)概c您一同成長(zhǎng),很多我們的產(chǎn)品創(chuàng)意來自于像您一樣的客戶老師,我們提供的不僅是產(chǎn)品,還有一個(gè)創(chuàng)新平臺(tái),我們期待您的參與,攜手發(fā)展,共創(chuàng)輝煌。實(shí)現(xiàn)中國(guó)夢(mèng),是全民族的事,生命科學(xué)領(lǐng)域中的你我同樣肩負(fù)使命,讓我們用不同的方式貢獻(xiàn)自己的力量!

  李記優(yōu)勢(shì)產(chǎn)品:蛋白Marker、EZ Trans細(xì)胞轉(zhuǎn)染液、CCK-8細(xì)胞活性增殖檢測(cè)試劑、支原體快速檢測(cè)試劑盒、核酸染料(GelRed)、EZ Protein any KD PAGE蛋白電泳試劑盒、熒光染料(Alexa Fluor 488, 555, 647,CY3, cy5)、胎牛血清、細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞轉(zhuǎn)染步驟等。

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