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細(xì)胞生物學(xué)
轉(zhuǎn)染試劑
EZ Trans mRNA轉(zhuǎn)染試劑

產(chǎn)品簡介
產(chǎn)品貨號 產(chǎn)品規(guī)格 原價(jià) AC04L061 300uL 800 ......
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產(chǎn)品描述
信使核糖核酸(mRNA)在細(xì)胞質(zhì)中啟動(dòng)蛋白質(zhì)翻譯,不需要進(jìn)入細(xì)胞核,可實(shí)現(xiàn)比DNA轉(zhuǎn)染更快的蛋白表達(dá),且避免基因整合風(fēng)險(xiǎn)。
EZ Trans mRNA轉(zhuǎn)染試劑是一種結(jié)合了陽離子聚合物和脂質(zhì)體優(yōu)點(diǎn)的轉(zhuǎn)染試劑,協(xié)同促進(jìn)轉(zhuǎn)染復(fù)合物進(jìn)入細(xì)胞,隨后在胞質(zhì)中釋放,能夠在多種細(xì)胞類型中實(shí)現(xiàn)高效、低毒的轉(zhuǎn)染效果。
訂購信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
EZ Trans mRNA轉(zhuǎn)染試劑 | AC04L061 | 300 uL |
EZ Trans mRNA轉(zhuǎn)染試劑 | AC04L062 | 1 mL |
運(yùn)輸與保存
藍(lán)冰運(yùn)輸。4℃保存,有效期 6 個(gè)月;-30℃至-10℃保存,有效期12個(gè)月。注:避免反復(fù)凍融。
使用方法(以 24 孔板為例,其他培養(yǎng)皿中轉(zhuǎn)染請參考表 1)
1. 接種細(xì)胞
對于貼壁細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一天,將細(xì)胞按照每孔1-2x105個(gè)細(xì)胞的量進(jìn)行鋪板,使其在轉(zhuǎn)染時(shí)密度為60%-80% 為佳。
對于懸浮細(xì)胞:轉(zhuǎn)染當(dāng)天,配制轉(zhuǎn)染試劑-核酸復(fù)合物之前,用PBS清洗細(xì)胞1-2次,用250 μL Opti-MEM I 減血清培養(yǎng)基 (無血清) 重懸細(xì)胞,在24孔板中進(jìn)行細(xì)胞鋪板,細(xì)胞密度為60-80%。
2. 準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染試劑-mRNA復(fù)合物
(1) 對于每孔細(xì)胞,將 0.5 μg待轉(zhuǎn)染mRNA加入到1.5mL離心管中,加入2 μL轉(zhuǎn)染試劑與mRNA 混合,室溫孵育3 min。
(2) 往上述混合物中加入100 μL Opti-MEM I減血清培養(yǎng)基(無血清),輕輕混勻,在室溫下靜置30 min,形成轉(zhuǎn)染試劑-核酸復(fù)合物。
(3) 30 min后,往上述復(fù)合物中加入250 μL Opti-MEM I減血清培養(yǎng)基(無血清),輕輕混勻。
3. 轉(zhuǎn)染細(xì)胞
(1) 細(xì)胞用PBS清洗1-2次,將上述350µL轉(zhuǎn)染試劑-mRNA復(fù)合物加入每孔細(xì)胞。
(2) 在 37℃,5% CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)12 h,無需更換新的培養(yǎng)液,之后即可檢測轉(zhuǎn)染效果。若需更長時(shí)間轉(zhuǎn)染,可在轉(zhuǎn)染12 h后補(bǔ)充500 μL培養(yǎng)基 (含血清),總體積達(dá)到 500μL,即達(dá)到常規(guī)的培養(yǎng)皿使用培養(yǎng)液的量,12-36 h后再進(jìn)行檢測。
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