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  • 一文看懂 | 如何用Annexin VPI法做細胞凋亡檢測

    2025-02-07 細胞凋亡過程常伴隨著明顯的細胞形態(tài)學變化,比如細胞凋亡早期,質(zhì)膜內(nèi)側(cè)的磷脂酰絲氨酸會翻轉(zhuǎn)到細胞質(zhì)膜表面;而在凋亡的中后期,隨著細胞質(zhì)膜通透性的增大,一些較大分子的化合物,如碘化丙啶(PI),便可自由擴散進入細胞,將細胞核染上紅色熒光。AnnexinVPI檢測法原理AnnexinV是一種鈣依賴性磷脂結(jié)合蛋白,能與PS高親和力特異性結(jié)合。它不能透過完整的細胞膜,而早期凋亡細胞的細胞膜是完好的,對PI有拒染性。但在凋亡中晚期的細胞和死細胞,PI能透過細胞膜而使細胞核染上。因此Ann...
  • 優(yōu)化原代細胞轉(zhuǎn)染效率的關(guān)鍵試劑與方法

    2025-01-22 在生命科學研究領(lǐng)域,原代細胞作為接近體內(nèi)生理狀態(tài)的細胞模型,一直備受關(guān)注。然而,對原代細胞進行有效的基因操作卻面臨諸多挑戰(zhàn),原代細胞轉(zhuǎn)染試劑的出現(xiàn)則為解決這一難題提供了關(guān)鍵途徑。原代細胞直接從生物體組織中分離獲得,保留了細胞的原始特性和功能,能更準確地反映細胞在體內(nèi)的真實行為。但由于其特殊的生物學特性,如生長緩慢、對外部刺激敏感等,使得將外源核酸導入原代細胞變得困難重重。傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)染方法在原代細胞上往往效果不佳,要么轉(zhuǎn)染效率低,無法滿足實驗需求;要么對細胞毒性大,導致細胞大量死...
  • 細胞培養(yǎng)實驗中胎牛血清FBS的作用有哪些

    2025-01-22 胎牛血清(FetalBovineSerum,簡稱FBS)是一種常用于細胞培養(yǎng)的血清,胎牛血清富含多種生物活性成分,包括生長因子、激素、營養(yǎng)物質(zhì)等。這些成分對于細胞生長、分化和代謝具有重要作用。在細胞培養(yǎng)中,胎牛血清通常被用作培養(yǎng)基的添加劑,以提供細胞生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子。為什么選擇牛血清牛血清是細胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,具有極為重要的功能。牛血清分為小牛血清、新牛血清、胎牛血清。其中胎牛血清是品質(zhì)高的血清,因為胎牛還未接觸外界,...
  • 提高轉(zhuǎn)染效率:低毒細胞轉(zhuǎn)染試劑的優(yōu)化與實踐

    2025-01-21 在細胞生物學研究領(lǐng)域,細胞轉(zhuǎn)染技術(shù)是一項至關(guān)重要的工具,它能夠?qū)⑼庠春怂岱肿訉爰毎麅?nèi),從而實現(xiàn)對基因功能的研究、蛋白質(zhì)表達調(diào)控等眾多關(guān)鍵實驗。而在這其中,低毒細胞轉(zhuǎn)染試劑正逐漸嶄露頭角,成為科研人員的得力助手。傳統(tǒng)的細胞轉(zhuǎn)染試劑往往存在細胞毒性較高的問題,這會對細胞的正常生理功能產(chǎn)生嚴重影響。高毒性可能導致細胞存活率降低,細胞形態(tài)發(fā)生改變,甚至引發(fā)細胞凋亡。這不僅干擾了實驗結(jié)果的準確性,還限制了某些對細胞狀態(tài)要求苛刻的研究。低毒細胞轉(zhuǎn)染試劑的出現(xiàn)則有效解決了這些問題。其最大...
  • 慢病毒濃縮液:病毒回收率高達92%

    2025-01-10 慢病毒載體可感染分裂細胞及非分裂細胞。其轉(zhuǎn)移基因片段容量較大,目的基因表達時間較長,不易引發(fā)宿主免疫反應(yīng)等諸多優(yōu)點;因此,慢病毒己經(jīng)成為表達外源基因或外源shRNA的常用載體形式之一,并且應(yīng)用越來越廣泛。慢病毒濃縮液介紹EZ慢病毒濃縮液是一種快速濃縮慢病毒的產(chǎn)品,使用未濃縮病毒上清與本產(chǎn)品低溫孵育后低速離心即可獲得濃縮病毒液。不同于傳統(tǒng)的耗時耗力的超濾、超速離心法,使用本產(chǎn)品操作簡便、快捷、安全,回收率高。慢病毒濃縮液優(yōu)勢?高濃縮比:濃縮體積高達240倍,如:可將120mL的...
  • BCA蛋白定量試劑盒有什么作用(附帶產(chǎn)品說明書)

    2025-01-10 BCA(Bicinchoninicacid)法是目前應(yīng)用比較廣泛的蛋白質(zhì)濃度測定方法?;陔p縮脲反應(yīng),即在堿性環(huán)境下蛋白質(zhì)將Cu2+還原成Cu+,Cu+與BCA試劑形成紫顏色的絡(luò)合物,在562nm處有高的吸光值,該反應(yīng)產(chǎn)物的量與蛋白質(zhì)濃度成正比。測定其在562nm處的吸光值,并與標準曲線對比,即可計算待測蛋白的濃度。該方法快速靈敏、穩(wěn)定可靠且對不同種類蛋白質(zhì)變異系數(shù)很小。試劑盒中提供了濃度穩(wěn)定的蛋白標準品用于制作標準曲線。BCA蛋白定量試劑盒產(chǎn)品作用準確靈敏,線性范圍廣:BC...
  • 干貨分享 | 細胞凍存與復蘇避坑指南

    2025-01-08 細胞凍存和復蘇是細胞培養(yǎng)中的關(guān)鍵環(huán)節(jié),直接影響細胞存活率和活力,關(guān)系到后續(xù)細胞實驗?zāi)芊癜凑沼媱澯行У剡M行。要想做好細胞凍存和復蘇,首先請牢記下面這四個字:慢凍快融!1、為什么要慢凍快融?凍存細胞時,細胞內(nèi)外環(huán)境中的水會形成冰晶。如果直接將細胞凍存到-196℃的液氮中,由于凍結(jié)過程中胞外溶液中的水先結(jié)冰,使胞外溶液不斷濃縮,引起細胞電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水及蛋白質(zhì)變性等,會導致細胞受到機械性損傷。2、細胞凍存-讓你細胞安心沉睡3、細胞復蘇-讓細胞滿血復活■細胞拿取盡量減少樣...
  • CFDA, SE 細胞增殖示蹤熒光探針檢測原理與注意事項

    2025-01-08 CFDA-SE可用于細胞示蹤,也可用于細胞增殖檢測。經(jīng)CFDA-SE標記的細胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究,且具有不會使鄰近細胞染色的功能。CFDA-SE常用于淋巴細胞的增殖檢測,也可用于成纖維細胞,自然殺傷細胞,造血祖細胞等其他細胞的增殖檢測。檢測原理CFDASE可以通過完好的細胞膜,進入細胞后被細胞內(nèi)的酯酶催化分解成CFSE。CFSE可以隨機地、不可逆地和細胞內(nèi)蛋白的賴氨酸殘基或其它氨基發(fā)生結(jié)合反應(yīng),并標記這些蛋白,CFDA-SE標記細胞呈綠色熒光。CFDA-SE標記的分裂細...
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